Protective effect of N-acetyl-L-cysteine and rosuvastatin against oxidative stress in fibroblasts from asymptomatic patients with X-ALD: a preliminary study

Introduction: Several studies in the literature have evaluated the role of oxidative stress and adjuvant therapies for X-linked adrenoleukodystrophy (X-ALD). Here, we investigated whether n-acetyl-L-cysteine (NAC) and rosuvastatin (RSV) could influence the generation of reactive species, redox status and nitrative stress in fibroblasts from asymptomatic patients with X-ALD. Methods: Skin biopsy samples were cultured and treated for 2 hours (37 °C) with NAC and RSV. Results: X-ALD fibroblasts generated high levels of reactive oxygen species. These levels were significantly lower in fibroblasts treated with NAC and RSV relative to untreated samples. The X-ALD fibroblasts from asymptomatic patients also had higher catalase activity, and only NAC was able to increase enzyme activity in the samples. Conclusions: Our results indicated that NAC and RSV were able to improve oxidative stress parameters in fibroblasts from asymptomatic patients with X-ALD, showing that adjuvant antioxidant therapy may be a promising treatment strategy for asymptomatic patients with this disease. (AU)

Increased levels of hexacosanoic acid in the brain of Winstar rats: a behavioral study

Introduction: X-linked adrenoleukodystrophy (X-ALD) is a peroxisomal metabolic disorder associated with mutations in the ATP-binding cassette sub-family D member1 (ABCD1) gene. Practically all male patients with X-ALD develop adrenocortical insufficiency during childhood and progressive myelopathy and peripheral neuropathy in adulthood. However, some male patients develop a fatal cerebral demyelinating disease named cerebral adrenoleukodystrophy. Although the exact mechanisms underlying brain damage in X-ALD are still poorly elucidated, it is known that hexacosanoic acid (C26:0) accumulation represents a hallmark in the pathogenesis of this disease. In this study, we examined whether an overload of C26:0 injected in Wistar rats was capable of causing behavioral changes in these animals. Methods: Egg lecithin in ethanol was dried under a nitrogen stream and mixed with C26:0 methyl ester. Male Wistar rats at 2-3 weeks of age were obtained from Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), divided into 8 groups, and submitted to an open field test. We then analyzed line crossings (locomotion and exploration), rearing (orienting and investigatory responses), grooming (anxiety manifestation), and latency to move for each animal. Results: Animals subjected to C26:0 administration presented fewer crossings and rearing episodes and a higher latency to move 45 minutes after C26:0 injection. The present work yields experimental evidence that C26:0, the main accumulated metabolite in X-ALD, can cause behavioral alterations in rats such as the impairment of locomotion and exploratory capabilities, as well as a reduction in orienting and investigatory responses. Conclusion: Although our results are preliminary, they are extremely important for future studies that investigate C26:0 accumulation and locomotor impairment in patients with X-ALD. (AU)

Determinação do limite mínimo de detecção da técnica de Nested-PCR para os poliomavírus JC e BK / Assessment of minimum detection limit of Nested-PCR for JC and BK polyomaviruses

Introduction: Polyomaviruses (BKV and JCV) cause infection mainly in immunocompromised adults. A sensitive and specific diagnosis tool is fundamental to demonstrate the BKV and JCV infections. Nowadays many laboratories are using a PCR technique for detecting polyomaviruses genome in clinical samples. In this context, the purpose of this study is to determine the threshold of detection of the nested-PCR for polyomaviruses JC and BK. Methods: Serial dilutions of the samples of BKV and JCV of known concentration (100 copies/mL, 50 copies/mL, 25 copies/mL, 10 copies/mL, 5 copies/mL, and 1 copy/ml) were subjected to the technique of nested-PCR. All dilutions were tested 11 times to determine the minimum detection limit. Results: The minimum detection limit of the nested-PCR for JC and BK viruses was 25 copies/mL. This dilution (25 copies/mL) showed 100% PCR positive reaction. Furthermore, we found that weak positive results were obtained at dilutions of 1,5 and 10 copies/mL in some repetitions. Dilutions of 25, 50, and 100 copies/mL always had very positive results. Conclusions: These values are similar to those reported in other studies, contributing to the indication of this PCR for potential diagnostic purposes.

Introdução: Os poliomavírus (JCV e BKV) causam infecções principalmente em adultos imunocomprometidos. Um diagnóstico sensível e específico é de fundamental importância para os pacientes portadores de JCV e BKV. Atualmente alguns laboratórios têm utilizado a técnica de PCR para a detecção do material genético destes vírus em amostras clínicas. Assim, o objetivo deste estudo é determinar o limite mínimo de detecção da técnica de nested-PCR para os poliomavírus JC e BK. Métodos: Diluições seriadas (100 cópias/mL; 50 cópias/mL; 25 cópias/mL; 10 cópias/mL; 5 cópias/mL e 1 cópia/mL) de controles positivos comerciais de JCV e BKV com concentrações conhecidas foram submetidas à técnica de nested-PCR semi-duplex. Todas as diluições foram testadas 11 vezes para determinação do limite mínimo de detecção. Resultados: O limite mínimo de detecção da reação de nested-PCR para os vírus JC e BK foi de 25 cópias/mL para ambos, com 100% de positividade das diluições testadas na reação de PCR. Ainda, pudemos observar que resultados positivos fracos foram obtidos nas diluições de 1, 5 e 10 cópias/mL em algumas das repetições realizadas. As diluições de 25, 50 e 100 cópias/mL sempre obtiveram resultado rancamente positivo. Conclusões: Estes valores são semelhantes aos relatados em outros estudos, contribuindo para a indicação desta reação de PCR para potenciais fins diagnósticos.

Blood transfusion-related immunomodulation

The phenomenon of transfusion-related immunomodulation (TRIM) has been studied since the observation of a higher kidney allograft survival in patients who had received a higher number of transfusions. Conversely, it has been suggested as one of the possible causes related to the development of infections in patients with multiple blood transfusions and/or after a major surgery, and has been also associated with a decreased function of natural killer cells (NK) and antigen-presenting cells (APCs), reduced cell-mediated immunity, and increased regulatory T cells (Tregs). This review aimed to conceptualize TRIM and discuss some aspects related to its mechanisms and the prevention of immunomodulatory events.

Controle de esterilidade de produtos de células progenitoras hematopoéticas do sangue periférico / Sterility control of hematopoietic progenitor cells from peripheral blood products

A taxa de contaminação microbiana dos produtos de células progenitoras hematopoéticas do sangue periférico é baixa. Neste estudo pesquisou-se a prevalência de hemoculturas positivas em células progenitoras hematopoéticas do sangue periférico (CPHSP) no Serviço de Hemoterapia do Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Do total de 618 coletas realizadas no período de 2000 a 2007, 26 (4,2 por cento) apresentaram contaminação por bactérias. O Staphylococcus coagulase-negativo foi predominantemente isolado nas hemoculturas. A antibioticoterapia pré e pós-infusão foi estabelecida de acordo com o microorganismo e seu antibiograma, sendo que, em cinco das doze infusões contaminadas realizadas, não foram administrados antimicrobianos profilaticamente. Episódios febris foram observados em sete pacientes (58 por cento), enquanto cinco (42 por cento) não apresentaram febre. Das doze infusões contaminadas realizadas, seis (50 por cento) apresentaram hemocultura pós-descongelamento positivas, enquanto as restantes (50 por cento) foram negativas. Isto se deve às propriedades bactericidas do DMSO, de células fagocitose-ativas e de temperaturas muito baixas atingidas na criopreservação. Autores têm relatado sucesso neste procedimento após a infusão desses produtos contaminados com o mínimo de consequências clínicas.

The rate of microbial contamination of hematopoietic progenitor cell products from peripheral blood is low. In this study, we investigated the prevalence of positive blood cultures of hematopoietic progenitor cells from peripheral blood in a hemotherapy service. Of a total of 618 samples taken during the period from 2000 to 2007, 26 (4.2 percent) were contaminated by bacteria. Staphylococcus coagulase-negative was the predominant bacterium isolated in blood cultures. Pre- and post-infusion antibiotic therapy was established depending on the microorganism and antibiogram, whereas in five out of twelve contaminated infusions, no antibiotics were administered prophylactically. Febrile episodes were observed in seven patients (58 percent), while five (42 percent) did not suffer from fever. Of the twelve contaminated infusions performed, six (50 percent) of the samples had positive blood cultures after thawing, while the others (50 percent) were negative. This is due to the bactericidal properties of DMSO, phagocytosis-active cells and the extremely low temperatures during cryopreservation. Authors have reported success in the procedure after the infusion of contaminated products with minimal clinical consequences.

Atividade hipolipidêmica do extrato de Cordia salicifolia em camundongos submetidos a dieta hiperlipidêmica / Hypolipidemic activity of Cordia salicifolia extract in mice on a hyperlipidemic diet

Introdução: O objetivo do presente estudo foi analisar a eficácia da utilização da Cordia salicifolia em camundongos submetidos a dieta hiperlipidêmica, através do monitoramento dos índices sorológicos de colesterol e triglicerídeos. Metodologia: Para o experimento foram usados camundongos (mus musculus), com peso médio de 54 ± 5 g, e com idade de 50 ± 5 dias, que foram divididos em 4 grupos de 10 animais. Camundongos recebendo água e com dieta normal, camundongos recebendo água e com dieta hiperlipidêmica, camundongos com dieta normal e administração do extrato de Cordia salicifolia e camundongos com dieta hiperlipidêmica e administração do extrato de Cordia salicifolia. Resultados e conclusões: Houve redução nos níveis séricos de colesterol total, tanto no grupo que recebeu dieta normal + extrato como no grupo com dieta hiperlipidêmica + extrato. Também foi significativa a redução nos níveis séricos de triglicerídeos nos animais que receberam dieta hiperlipidêmica + extrato, quando comparados aos camundongos que receberam dieta hiperlipidêmica + água (AU)

Introduction: The present study evaluates the effectiveness of Cordia salicifolia in reducing serum total cholesterol and triglyceride levels in mice on a hyperlipidemic diet. Methodology: 40 specimens of mice (Mus musculus, mean weight 54 ±5 g and mean age 50 ± 5 days) were studied. They were divided into 4 groups of 10 animals each: mice on a normal diet receiving water, mice on a hyperlipidemic diet receiving water, mice on a normal diet receiving Cordia salicifolia extract, and mice on a hyperlipidemic diet receiving Cordia salicifolia extract. Results and conclusion: There was a serum total cholesterol reduction in the normal diet + extract group as well as in the hyperlipidemic diet + extract group. Also, the serum triglyceride reduction observed in animals on the hyperlipidemic diet + extract was significant as compared to mice on the hyperlipidemic diet + water (AU)

Técnicas de reprodução assistida no tratamento da infertilidade / Assisted reproduction techniques in the treatment of the infertility

A infertilidade afeta aproximadamente de 10 a 15% dos casais, sendo que o componente masculino isolado é responsável por 30% das causas de infertilidade conjugal e, em associação com o fator feminino, por mais de 20%. As causas mais comuns de infertilidademasculina relacionam-se à espermatogênese pobre, a maioria de causa inexplicável ou idiopática e devido a causas genéticas. Entre os problemas femininos estão os hormonais, idade avançada, anormalidades, tortuosidades, fimbrias tubais, endometriose e ovário policístico. Os tratamentos para a infertilidade incluem as técnicas de reprodução assistida: ovulação induzida, inseminação artificial, fertilização in vitro e injeção intracitoplasmática de esperma.

Infertility affects nearly 10 to 15% of couples, being the single male factor responsible for 30 % of the matrimonial infertility reasons, and in association with the female factor, for over than 20%. The most common causes of male infertility are related to poor spermatogenesis, most for unexplainable or idiopathic cause, and due to genetic causes. Among the female problems are the hormonal, advanced age, abnormalities, tortuosities and tubal fimbria, endometriosis and polycystic ovary. The therapies to infertility include the assisted reproduction techniques: induced ovulation, artificial insemination, in vitro fertilization and sperm’s intracitoplastic injection.

The transition from memory retrieval to extinction

A retenção das memórias é avaliada através da sua expressão. A expressão do traço mnemônico é iniciada freqüentemente pelo estímulo condicionado (CS); porém, como definido por Pavlov, a apresentação apenas do CS induz extinção. A esquiva inibitória de apenas uma sessão (IA) é um paradigma de condicionamento ao medo muito utilizado, no qual o CS é a parte segura da caixa de treinamento (plataforma), o estímulo incondicionado (US) é um choque aplicado nas patas do animal quando o mesmo desce da plataforma e a resposta condicionada é permanecer na área segura. Na IA, a expressão da memória é medida na ausência do US, sendo definida como a latência para descer da área segura. A extinção é instalada no momento da primeira sessão de teste, tal como fica claramente demonstrado pelo fato de que várias drogas, entre elas inibidores de síntese protéica, de PKA e de ERK e antagonistas dos receptores NMDA, impedem a extinção quando administrados no hipocampo ou na amígdala basolateral no momento da primeira sessão de teste, mas não mais tardiamente. Alguns, mas não todos os sistemas moleculares requeridos para a extinção, também são ativados pela expressão das memórias, fortalecendo a hipótese de que mesmo que a expressão seja comportamental e bioquimicamente necessária para a ocorrência da extinção, este último processo constitui um novo aprendizado, secundário a expressão do traço original.